艾滋病是由艾滋病病毒(HIV)感染引發的一種危害極大的傳染病,HIV感染人體后一般會迅速找到靶細胞(主要是CD4細胞)并開始大量復制。在急性感染期,感染者體內每立方毫米血液即可檢測到數萬甚至數十萬的病毒拷貝。
艾滋病的預防和控制,盡早確診HIV感染是關鍵,可靠及時的HIV檢測技術這時候就顯得尤為重要。近年來,隨著生物檢測技術的發展,HIV的檢測技術也取得了長足進步。HIV感染者確診所需要的時間大大縮短,檢測的可靠性和可操作性大大得到了提高?,F在的HIV檢測技術,可分為HIV抗體檢測和非HIV抗體檢測。
酶聯免疫吸附法(ELISA)
ELISA是檢測HIV的一種固相免疫測定技術,需要先將抗體或抗原包被到某種固相載體表面,并保持其免疫活性。目前為止,ELISA試劑已經發展到第四代,也就是人們現在所說的抗原抗體聯合檢測試劑。使用第四代檢測試劑檢測,HIV感染確診窗口期可縮短到4~6周。ELISA檢測的特點是快速可靠,是目前最常用的HIV篩查方法。
免疫熒光法(IFA)
一種比較早也比較可靠的生物檢測技術。其特點是操作簡便,敏感性及特異性要比ELISA法高,缺陷是IFA對某些血清非特異性熒光難以去除,儀器價格昂貴,結果判斷主觀性強。
明膠顆粒凝集試驗(PA)
PA是一種快速、簡便的HIV血清抗體檢測方法,此方法操作簡單,無需特殊儀器設備,適合對少量樣本的檢測,但靈敏度和準確度不如ELISA法。
金標快速反應試驗(SPOT)
免疫金標記技術用于快速檢測HIV抗體。特點:出結果快,特異性好,快速簡便,適用于應急檢測以及邊遠地區檢測。
免疫層析/滲濾實驗
屬于金標法的一種,是近年迅速發展起來檢測方法。特點是特異性好,敏感度也較高,適宜于偏遠地區臨床用血檢測。
無創性HIV抗體檢測
無創性HIV抗體檢測適用人體體液來檢測HIV,這些體液的收集避免靜脈穿刺,優點是標本來源是無創的,易被接受,尤其是采血困難的人群,缺點是不適合大量樣品的同時檢測。
HIV感染人體后,人體免疫系統需要經過一段時間的免疫應答才能逐漸產生足量抗體,所以在理論上HIV抗體檢測是“滯后的”。
核酸檢測
眾所周知,艾滋病患者有個感染窗口期,一般在4周-6周左右,也就是說,感染初期,一部分的人由于血液中病毒數量較少,傳統臨床的檢測手段暫時未能檢測出病毒,出現假陰性的可能性。
隨著生物技術的發展,HIV核酸檢測手段逐漸得到了人們的認可。
核酸檢測可以直接檢測HIV RNA,可在發現血清抗體陽轉之前檢測到HIV感染,而且比P24抗原檢測方法更靈敏。目前最新的超靈敏HIV核酸檢測技術已經將HIV檢測窗口期縮短至3~7天。
HIV核酸檢測通常使用PCR和RT-PCR技術,可分為定性檢測和定量檢測兩大類。其特點是可靠靈敏,窗口期大大縮短。缺點是成本較高,難以大范圍免費推廣。
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